GENES INCLUÍDOS
IgH, IgK, TCRD, TCRG
DOCUMENTOS
Formulário para exames de Oncohematologia preenchido (FORM-DA-002 EXAMES ONCOHEMATOLOGIA).
Obrigatório informar a linhagem suspeita, se B ou T
INSTRUÇÕES DE COLETA E TRANSPORTE
Preparo do paciente: Não há (não é necessário jejum)
Material:
Leucemia Linfocítica Aguda: 4mL de medula óssea em EDTA (tubo tampa roxa).
Outras doenças linfoproliferativas: 4mL de medula óssea ou 8mL de sangue total em EDTA (tubo tampa roxa).
A coleta do material medula óssea é um procedimento médico que deverá ser realizado por profissionais da área de oncohematologia. Não pode ser colhido no Geneticenter.
Observações: Para LLA, este teste pode ser aplicado no monitoramento de DRM (Doença Residual Mínima). Para isso, deve ser enviada uma primeira amostra ao Diagnóstico e outra no D55 (final da indução da remissão). Para avaliação de DRM é obrigatório que o monitoramento seja feito em medula óssea.
Conservação: 48 horas refrigerado entre 2oC e 8oC
Critérios para amostras recebidas com restrição: volume inferior ao recomendado, prazo de coleta superior ao recomendado, temperatura superior à recomendada.
Critérios para rejeição de amostras: Amostra coagulada, hemolisada ou congelada, anticoagulante inadequado.
METODOLOGIA
PCR rearranjos IgH, IgK, TCRD, TCR-G seguido de homo/heteroduplex
LIMITAÇÕES DO EXAME
– Para doenças linfoproliferativas de células T, são estudados rearranjos nos genes TCRG, TCRD e Sil-TAL. Para doenças linfoproliferativas de células B, são estudados rearranjos nos genes IgH, IgK, TCRG e TCRD. O método identifica 90 a 95% das populações de células clonais.
– Este teste não detecta todos os rearranjos V-D-J possíveis nos genes analisados. Pode haver clones com rearranjos raros não detectados pela técnica.
– O limite de detecção é de 10-3 (um blasto em 1.000 células normais), inferior à da DRM por citometria de fluxo (10-4/10-5) ou do PCR quantitativo (10-6). Esta técnica é realizada com o objetivo de detectar pacientes com grande quantidade de DRM que têm grande chance de recaída. Ela também permite confirmar o resultado de citometria de fluxo (CF) no final da indução.
DOENÇAS RELACIONADAS
Leucemia Linfocítica Aguda, Doenças linfoproliferativas
PALAVRAS-CHAVE
Clonalidade T, Clonalidade B, leucemia, LLA-T, LLA-B, IgH, TCRG, IgK, TCRD, Rearranjo, DRM
PRAZO
LLA: 7 dias úteis após o D35
Outras doenças linfoproliferativas: 7 dias úteis
COMENTÁRIOS
– Epidemiologia: Utilizando a técnica acima mencionada, cerca de 95% dos pacientes com LLA apresentarão pelo menos um rearranjo clonal para monitoramento de DRM.
– Referências:
Scrideli CA et al. A simplified minimal residual disease polymerase chain reaction method at early treatment points can stratify children with acute lymphoblastic leukemia into good and poor outcome groups. Haematologica. 2009 Jun;94(6):781-9. doi: 10.3324/haematol.2008.003137.
Atualizado em 28/02/2024