DOCUMENTOS
Pedido médico
INSTRUÇÕES COLETA E TRANSPORTE
Preparo do paciente: Não há (não é necessário jejum).
Material: 4ml de Sangue em EDTA (tubo tampa roxa).
Conservação: 7 dias refrigerado entre 2 e 8°C.
Critérios para amostras recebidas com restrição: Amostra com volume inferior ao solicitado, amostra fora do prazo de viabilidade.
Critérios para rejeição de amostras: Anticoagulante incorreto, condições de conservação inadequadas, volume insuficiente, material congelado, coagulado ou severamente hemolisado.
METODOLOGIA
A determinação do número das repetições GAA e a detecção dos alelos expandidos são realizadas pela combinação das técnicas de PCR-STR (Reação em Cadeia da Poimerase – “Short Tandem Repeats” e TP-PCR(“Triple Repeat Primed-Reação em Cadeira da Polimerase), que amplificam uma região específica no íntron 1 do gene FXN. A separação dos fragmentos é realizada por eletroforese capilar.
LIMITAÇÕES DO EXAME
O número de repetições GAA pode apresentar variação de aproximadamente 5% para mais ou para menos.
Casos raros de falso-negativos podem ser causados por polimorfismos na região de ligação dos iniciadores, resultando em falha de amplificação alélica (efeito).
O teste não permite distinguir indivíduos homozigotos e indivíduos heterozigotos nos quais um dos alelos não é detectado pela metodologia utilizada.
A técnica TP-PCR é capaz de detectar alelos expandidos, porém não possível determinar o tamanho da expansão GAA.
A técnica não é capaz de detectar mutações de ponto, deleções e / ou duplicações.
A metodologia empregada não permite diferenciar interrupções de outros nucleotídeos na sequência da expansão do trinucleotídeo GAA.
DOENÇAS RELACIONADAS
Ataxia de Friedreich.
PALAVRAS-CHAVE
Ataxia de Friedreich, gene FXN
PRAZO
13 dias úteis